BD Pharmingen556547 AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T/盒

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BD是世界上zui大的研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售醫(yī)療設(shè)備，醫(yī)療系統(tǒng)和試劑的醫(yī)療技術(shù)公司之一，致力于提高quan世界人類(lèi)的健康水平，BD專(zhuān)注于改進(jìn)藥物傳輸，提高傳染性疾病和癌癥診斷的質(zhì)量和速度，推進(jìn)新型藥物和疫苗的研發(fā)與生產(chǎn)。BD公司具有強(qiáng)大的研發(fā)能力和世界上zui棘手的多種疾病進(jìn)行斗爭(zhēng)。公司于1897年在紐約成立，總部位于美國(guó)新澤西州的富蘭克林湖，業(yè)務(wù)遍及全球。公司的業(yè)務(wù)可分為BD醫(yī)療、BD診斷和BD生物科學(xué)三大類(lèi)。生產(chǎn)銷(xiāo)售包括醫(yī)用耗材、實(shí)驗(yàn)室儀器、抗體、試劑、診斷等產(chǎn)品。公司的服務(wù)對(duì)象包括醫(yī)療機(jī)構(gòu)、生命科學(xué)研究所、臨床實(shí)驗(yàn)室、工業(yè)單位和普通大眾。

BD AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

BD Pharmingen556547 AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T/盒，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：BD

產(chǎn)品貨號(hào)：556547

產(chǎn)品名稱(chēng)： AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：AnnexinV-FITC/PI

產(chǎn)品規(guī)格：100T/盒

產(chǎn)品說(shuō)明：

一、 概述

在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲an酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細(xì)胞發(fā)生凋亡最早期，膜磷脂酰絲an酸(PS) 由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)，這一變化早于細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DN*斷化和細(xì)胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象，Annexinv是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲an酸有高度親和力，故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲an酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexinv被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。碘化丙啶(Propidium lodide.PI) 是一種核酸染料，它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜，但凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性的增加，Pl能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用，就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。

二、 BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細(xì)胞周亡雙染試劑盒的組份:

Product code Description

556547      Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit lcomponents.

556547a     Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E)

5565476     Annexin VFITC(51-65874X)

556547C     Propidium lodide Staining Solution(51-66211E)

三、 BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細(xì)胞周亡雙染試劑盒的操作步驟:

貼壁細(xì)胞需用0.25%的yi酶消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的yi酶消化時(shí)，注意必須che底清除EDTA: 在標(biāo)記前用1XPBS或1xbindingbufer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2+整合，影響Annexin V的結(jié)合。

(1) 用去離子水將10xBinding Buffer稀釋成1xBinding Buffer;

(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集: 離心5分鐘，貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的yi酶消化收集后(注: yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰絲an酸與Annexin V-FITC的結(jié)合)，于室溫2000rpm離心5~ 10分鐘，收集細(xì)胞

(3) 細(xì)胞洗滌: 用預(yù)冷1XPBS (4^OC) 重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5 ~ 10分鐘，洗滌細(xì)胞

(4)加入300uL的1xBinding Buffer 懸浮細(xì)胞:

(5) Annexin V-FITC標(biāo)記: 加入5uL的Annexin VFITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘:

(6) PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5uL的PI染色

(7) 上機(jī)前，補(bǔ)加200L的1xBinding Buffer.

四、 BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細(xì)胞凋亡雙染試劑盒的保存:

4°C保存，兩個(gè)月內(nèi)可保持穩(wěn)定; 避免反復(fù)凍融。

五、 BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細(xì)胞周亡雙染試劑盒的注意事項(xiàng)：

(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)

(2) PI (propidium iodide，碘化**)有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套

(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀(guān)察

(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)

(5)在細(xì)胞洗滌的未尾一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(6) 為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)

(7) PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首先進(jìn)行Annexin VFITC染色，最短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。

BD AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

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